加入收藏
百奥莱博公司客服电话百奥莱博QQ百奥莱博QQ百奥莱博QQ
百奥莱博公司微信服务号

产品目录

长片段Taq酶扩增预混液图片
产品货号:
ALH253
中文名称:
长片段Taq酶扩增预混液
英文名称:
2×Long-Taq PCR MasterMix
产品规格:
0.5ml|5ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液等成分。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高,二级结构丰富的片段扩增。


本制品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Long-Taq PCR MasterMix,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积即可,使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。




组分0.5mL5mL
2×Long-Taq PCR MasterMix0.5mL5mL
说明书1份1份

保存:-20℃


  • 经检测无外源核酸酶活性。
  • PCR方法检测无宿主残余DNA。
  • 能有效地扩增人基因中的单拷贝基因。
  • 室温存放一周,无明显活性改变。



  • 扩增长片段强烈推荐使用0.2μL薄壁管。其他试管未经测试。较厚的试管在92℃时不能有效地使模板变性。变性时,尽可能缩短变性时间,降低变性温度。第一步变性在92~94℃下进行2分钟(GC含量高可延长时间达5分钟)。长片段在循环过程中尽可能缩短变性时间(92~94℃下进行10~15秒),除非模板中富含GC,则95℃下变性30秒。这可以防止DNA脱嘌呤和链断裂,对于所需扩增的基因组DNA片段终长度超过12kb时,应该尽可能的降低变性温度和时间。变性需要的时间在不同的PCR仪器上稍有不同。
  • 如果扩增模板GC含量高或者扩增片段比较长,可在反应混合物中加入甜菜碱或者DMSO,甜菜碱终浓度1-2.5M;DMSO到终浓度1%~8%,最常用2%(<30kb)或者4%(>30kb)往往会改善扩增效果。
  • 扩增长片段,引物一般终浓度为0.3~1μM,长度最好为27~36bp;退火温度一般在65~70℃,此时退火温度和延伸温度基本一致,可将退火延伸在同一个温度进行,使用2阶段扩增法。当然如果设计的引物在20bp左右,则还是使用传统3阶段扩增法为好。



以下举例仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定最佳反应条件。
  • 用2×Long-Taq PCR MasterMix,以人基因组DNA为模板,扩增1kb的片段,反应体系为50μL(如反应体系不同,可按此比例增加或减少用量)。
    成分用量
    模板λ噬菌体DNA
    人基因组DNA
    0.1~5ng
  • 1~1μg
  • 引物1(20μM)0.5~1μL
    引物2(20μM)0.5~1μL
    2×long-Taq MasterMix25μL
    ddH2O至50μL
  • PCR反应循环的设置:
    温度时间循环数
    94℃3min1
    94℃30sec 30
    55℃30sec
    72℃1min
    72℃5min1
  • 结果检测:反应结束后取5μL反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。

相关搜索:长片段Taq酶扩增预混液PCR MixMasterMixPCR预混液PCR反应液PCR扩增Taq酶长片段DNA大片段DNADNA模板2×Long-Taq PCR MasterMix
首页 |  关于我们 |  联系我们 |  在线咨询 |  网站地图
北京百奥莱博科技有限公司 京ICP备14007103号-3